瓜达卢佩皇家圣玛利亚修道院（Real Monasterio de Santa María de Guadalupe）建在圣母向牧羊人显现的地方。建筑分为四部分：教堂-圣殿，会议厅大楼，穆德哈尔式回廊和哥特式回廊。整个修道院的建筑风格为哥特-穆德哈尔式风格，两侧伫立着八个塔楼，它们当中最为著名的是圣安娜塔楼（Torre de Santa Ana）和波特塔楼（Torre de Portería）。修道院的祭坛非常宏伟、美丽，全部由木质装饰建成。圣物龛是16世纪费利佩二世（Felipe II）国王的办公桌。唱诗班的座椅是十八世纪时建造的，上下两层，设计精美。圣器收藏室的装饰更是绚丽多姿。在圣杰罗姆礼拜堂（Capilla de San Jerónimo）内，收藏着西班牙绘画名家苏巴朗（Zurbarán）的代表作之一，“圣杰罗姆的神化（La Apoteosis de San Jerónimo）”。该修道院被联合国教科文组织列为人类遗产。此外，修道院内还座落着一个收藏手绘古书的刺绣博物馆（Museo del Bordado），藏有重要泥金手抄本及苏巴朗其他油画。
皇家瓜达卢佩圣玛利亚修道院